— 思科捷星博士 —

科普时间到 

✦小RNA有大作用✦

近年来，microRNA的相关研究越来越热门，通过NCBI PubMed数据库的检索可以发现，microRNA的PubMed文献篇数明显增加，2021年该方向的研究文献更是突破了2万篇。

啥是microRNA呢？

microRNA（miRNA） 属于小RNA（small RNA）的一种，是一类由内源基因编码的长度约为20-24个核苷酸的非编码单链RNA分子，主要在真核生物中参与转录后基因的表达调控。

在动植物以及病毒中已经发现有28645个miRNA 分子(Release 21: June 2014)。大多数miRNA 基因以单拷贝、多拷贝或基因簇的形式存在于基因组中(Lagos2Quintanaet al, 2001;Lau et al,2001) 。

长度虽短，也是有背景的~

He L, et al. （2004）Nat Rev Genet

microRNA（miRNA）也是基因转录来的，在基因组上也有其编码的位点，通常位于基因间（intergenic）或位于内含子（intronic）区域。

在细胞核内，基因组DNA 进行初级转录，转录生成较长的RNA分子，有些可长达几千个碱基，具有5’端帽子和3’端polyA结构。这些长的RNA分子被双链RNA特异的核糖核酸酶Drosha切割成长度大约70-100碱基的、具发夹结构的RNA分子，前体microRNA（pre-miRNA）。前体microRNA通过核输出蛋白exportin5 机制转运到细胞质，然后被第二个双链RNA特异的核糖核酸酶Dicer切割，得到20-24nt大小的成熟的miRNA产物。

不要小看我，我的命名也很严格哦

miRNA成熟体命名规则，以动物miRNA为例：

①确定命名规则之前发现的miRNA，保留原来名字，如hsa-let-7。

②命名规则详解：首先是物种名称，其次是miR（miRNA成熟体简写），然后阿拉伯数字（被发现的先后顺序），高度同源的miRNA在数字后加上英文小写字母（a,b,c,…）。由不同染色体上的DNA序列转录加工而成的具有相同成熟体序列的miRNA，则在后面加上阿拉伯数字以示区分，如hsa-miR-199a-1和hsa-miR-199a-2。另外，通常一个miRNA前体两个臂可能分别产生miRNA，这时有两种命名，一是在表达水平较低的miRNA后面加上*号，如rno-miR-9*。二是如果没有明显的表达差异，则以“-5p”和“-3p”分别命名。如hsa-miR-26b-5p和hsa-miR-26b-3p，分别表明从hsa-mir-26b前体的5’端臂和3’端臂加工而来的。

我很优秀，小RNA也有大作用！

miRNA可以通过破坏靶mRNA的稳定性、抑制靶mRNA的翻译来对靶mRNA发挥调控作用。成熟的单链miRNA与类似RNA诱导沉默复合物（RISC）结合，形成miRNA 蛋白复合物miRISC， 并参与RNA干扰反应（RNAi）。在动物中，结合在复合物上的miRNA会结合到序列基本互补（并非完全互补）的mRNA上，但这种结合往往不像RNAi反应那样参与mRNA降解，而是阻止所结合的mRNA的翻译，导致相应基因表达水平的下降。大约60%的miRNAs为独立表达，15%左右的miRNAs成簇表达，还有25%的miRNAs位于内含子。

miRNA的研究取得了不少成果，研究成果表明其在细胞生长、个体发育和疾病发展等过程中起重要作用。自lin-4、let-7发现参与调控线虫时序发育以来，又在拟南芥、果蝇、斑马鱼、人类等很多样本发现可以调控胚胎发生及器官分化的miRNA。miRNA可以调控信号通路和代谢过程，比如发现miR-122调控CAT-1、AMP信号通路，调节肝脏中氨基酸代谢和脂肪代谢。在疾病的研究中，miRNA也起到很重要作用，miRNA可以调控疾病的发生和发展，比如miR-144、miR-150、miR-182、miR-103、miR-107等与二型糖尿病有关；miR-9、miR-29a、miR-29b与阿尔兹海默症有关。一些miRNA也是一些疾病的标志物，对疾病诊断有重要作用。miRNA与肿瘤作用是双面性，有抑制也有促进作用，主要看作用的靶基因，比如miR-331-3p在肝癌的发生中起到刺激作用，而miR-122在肝癌的抑制过程中发挥作用。另外，miRNA药物的作用机理也显现出医学上的潜在突破。

来了！思科捷来助力你的miRNA实验

对miRNA的研究分析方法很多，如miRNA靶基因的预测分析、GO富集分析、miRNA测序、 ceRNA分析、芯片分析、表达分析等。其中，miRNA的提取是最基础的实验步骤，思科捷miRNA提取有多种样本试剂盒，采用专门吸附miRNA的特殊硅基质膜，配合独特的裂解液和缓冲液，能够高效率获得高纯度的miRNA。

速度与纯度，性能与价格，

就是这么匹配~

miRNA的长度比较短，因此常规的RT- qPCR 很难对其进行直接定量分析，需要借助技术手段在逆转录过程中对其加长处理，目前常用的方法有加尾法和茎环法。思科捷都有哦~~~

 

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